一、用途
免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于分析。
亲和柱与荧光仪或HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
二、概述
黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、花生、坚果、棉籽、饲料、植物油以及动物组织和血液中。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染频率均居于首位。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。牛乳及其制品易受到黄曲霉毒素M1污染。
三、原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过离心、脱脂后,缓慢的通过黄曲霉毒素M1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇或乙腈洗脱黄曲霉毒素M1,然后注入到分析半岛游戏平台官网入口网址
中用于检测。
四、包装组成
每一个盒中包括各种规格的黄曲霉毒素M1免疫亲和柱及1份说明书。
五、样品处理
方法一:适用于牛乳样品
取牛乳样品,加热,温浴;离心,恢复至室温;取中间液体上样。
稀释倍数:0.025
方法二:适用于婴幼儿奶粉
称取奶粉,溶解、混匀,定容;离心,恢复至室温;取中间液体上样。
稀释倍数:0.125
方法三:适用于成人奶粉
称取奶粉,溶解、混匀,定容;离心,恢复至室温;取中间清液上样。
稀释倍数:0.25
方法四:适用于酸奶、奶酪及乳酸饮品
称取样品,加入乙腈,震荡混匀;离心,恢复至室温;取上层清液,定容,混匀,全部上样。
稀释倍数:0.4
六、操作程序
取出免疫亲和柱,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上;(3mL的免疫亲和柱去掉上方塞子,安装上转接头,将转接头另一端与注射器固定后使用)
将柱子与气控操作架上的注射器连接固定,取适量说明书步骤7中处理后的溶液上样;
去掉亲和柱下方堵头,调节开关,使液体以1~2滴/秒的速度流出;
待液体排干后,首先用0.1%Tween-20水溶液洗涤10mL,再用蒸馏水或去离子水洗涤10mL,流速2~3滴/秒;
1、采用HPLC分析时,按以下步骤操作:
待液体排干后,更换新针筒,上样乙腈,用刻度试管接洗脱液;洗脱后液体用氮气吹至近干;用乙腈水溶液溶解并定容;洗脱液过滤后转移至样品瓶用于HPLC分析。
2、采用荧光仪分析时,按以下步骤操作:
待液体排干后,上样甲醇,用一次性玻璃试管接洗脱液;洗脱后液体可用于荧光仪检测;使用荧光仪需加入显色工作液
* 每次上样前都要将上次液体完全排干。
* 显色工作液现用现配,配制后可保存8h。
* 也适用于GB 5413.37-2010。
七、结果判读
黄曲霉毒素M1的含量=检测浓度×稀释倍数
八、贮藏条件及保存期
贮藏条件:2~8℃。
保存期:该半岛bd体育手机客户端
有效期为12个月。